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9.如图为某种cDNA基因的制作流程图。下列相关叙述正确的是RNA链DNA链①核酸酶H②RNA单链杂交双链双链DNAA.催化①②过程的酶都能促进双链间氢键的形成B.核酸酶H能催化杂交双链上的磷酸二酯键断裂C.该双链DNA上不含与RNA聚合酶结合的碱基序列D.该双链DNA在PCR仪中扩增时需提供DNA连接酶【答案】C【解析】催化①②过程的酶分别是逆转录酶和DNA聚合酶，作用的都是磷酸二酯键；据图可知，核酸酶H能催化杂交双链转变成单链DNA,作用的是氢键；RNA聚合酶结合在DNA的非编码序列中，cDNA是以RNA为模板合成的，不含非编码序列，所以该双链DNA上不含与RNA聚合酶结合的碱基序列；PCR是在体外扩增，在高温条件下两条链解开螺旋成为两条单链，两条子链在引物的作用下都是由5'端到3'端延伸，所以PCR只需要耐高温的DNA聚合酶，不需要DNA连接酶。

16.构建基因表达载体时，可利用碱性磷酸单酯酶催化载体的5'-P变成5'-OH,如图所示。将经过该酶处理的载体与外源DNA连接时，由于5'-OH与3'-OH不能连接而形成切口(nick)。下列叙述正确的是33'外源DNAnick①zT4 DNAnickD HOZ连接酶重组载体了碱性磷酸单酯酶载体A.外源DNA也必须用碱性磷酸单酯酶处理B.经碱性磷酸单酯酶处理的载体不会发生自身环化C.T4DNA连接酶与DNA聚合酶均可作用于磷酸二酯键D.重组DNA经过1次复制可得到不含nick的子代DNA【答案】BC【解析】外源DNA不能用碱性磷酸单酯酶处理，否则无法形成重组载体；经碱性磷酸单酯酶处理的载体，由于5'-OH与3'-OH不能连接而形成切口(nick),不会发生自身环化；T4DNA连接酶与DNA聚合酶均可作用于磷酸二酯键，前者主要用于连接DNA片段，后者用于DNA复制过程中脱氧核苷酸的连接；DNA的复制方式是半保留复制，重组DNA经过1次复制，可得到2个含nick的子代DNA。