6.(15分,除标注外,每空1分)》(1)超数排卵内细胞团(2分)》(2)显微操作去核法(2分)孤雄(3)DNA,显微镜有丝分裂中期(4)2(3分)远缘杂交(3分)【解析】(1)对实验小鼠注射促性腺激素,使其超数排卵,从而获得更多的卵母细胞;在体外选用特制的培养液培养至囊胚期,并从内细胞团中分离、筛选出胚胎干细胞(2)分离动物细胞的细胞核采用显微操作技术;去除精卵融合细胞M中的雌原核,再对处理后的细胞进行进一步的培养、分离和筛选,可得孤雄单倍体胚胎干细胞。(3)自发二倍体相比正常细胞染色体组数加倍,DNA分子加倍,所以通过测定分析细胞内DNA含量,或利用显微镜观察处于有丝分裂中期细胞的染色体数目进行确定(4)小鼠一大鼠杂交细胞是小鼠孤雄(雌)单倍体干细胞和大鼠孤雌(雄)单倍体干细胞融合形成,所以含有2个染色体组,该技术实现了远缘杂交的可能,突破了有性杂交的局限
8.(15分,除标注外,每空2分)I.(1)体积分数为70%消毒(1分)(2)薄B自来水Ⅱ.(3)DNA连接酶(4)传代C【解析】I.(1)组织培养中的灭菌为先用体积分数为70%的乙醇浸泡10min,再用5%次氯酸钠溶液浸泡。(2)原球茎细胞的细胞壁薄,将原球茎置于细胞分裂素大于生长素(MS培养基十NAA/6-BA=1:10)中,促进芽的分化。炼苗是指将无菌幼苗移栽到实验室外,先用自来水洗掉根部的琼脂,以免琼脂发霉引起烂根,幼苗需适应外界环境,无需用无菌水洗。Ⅱ.(4)当培养的神经干细胞达到一定密度时产生接触抑制,换瓶后进行传代培养以得到更多数量的细胞。细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中进行,CO2的作用是维持培养液的pH,C项错误。故选C项。
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