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问题。24.(每空2分，共20分)人的血清蛋白(HSA)具有重要的医用价值，研究人员欲用乳腺生物反应器来大量生产HSA。图1为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322,其中Amp"表示氨苄青霉素抗性基因，Neo“表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成木端完全不同的4种限制酶的切割位点。HSA只能从血浆中制备，以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的三条途径如图2所示。请问答下列问题：BamH IEcoR ITthⅢ1ThⅢ1 BamH I EcoR I复制原点NeoPst I-AmpEcoR I HSA基因PstIpBR322图1农杆菌水稻水稻胚乳细胞受体细胞HSA中的rHSA基因大肠杆菌大肠杆菌中的rHSA血山羊膀胱上皮细胞中的rHSA图2(1)人工构建BR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外，还必须有(答山两点)等。(2)据图1分析，在构建基因表达载体时，选择限制酶切割质粒和目的基因，可提高日的基因和载体的正确连接率。双酶切法的优点之一是避免质粒与日的基因之问的(3)将农杆南与水稻受休细胞混合后共同培养，片在让T质粒的进入水稻受体细胞。常用标记的日的基因片段作为探针检测日的基因是否整合到受体细胞的染色体DNA上，为检测日的基因的表达情况，可提取受体细胞的蛋白质，用进行杂交实验。(4)人体合成的初始HSA多肽，需要经过加L工形成正确的空问结构才能有活性。与图2中途径Ⅱ相比，选择途径I获取HSA的优势是水稻具有系统，能对初始HSA进行高效加工。(5)科学家培养出一种转基因羊，其膀胱上皮细胞可以合成人血清白雀白并分泌到尿液中。其培育方法中将重组质粒通过法导入山羊的细胞。与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受限制，受休米源更广泛。高：物试题第8页（共8页）》