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酶的作用下将脱氧核苷酸连接到引物的(填“3”或“5”)端，以延伸子链。(2)限制酶及识别序列如表2所示。构建CBF1-EGFP重组型启动子质粒时，要选择限制酶和SalI分别对图中a、b两处进行切割，EGFP的下游需要添加序列，使转录终止。表2限制酶BamH IEcoR ISalISma I识别和切割序列G GATCC GAATTC GTCGACGGGCCC(3)检测含CBF1-EGFP重组型启动子质粒是否构建成功时，将重组质粒导人大肠杆菌。培养后将大肠杆菌涂布到含有的培养基上，挑选单菌落并提取DNA,经酶切后利用表1中所示的两种引物进行PCR扩增和鉴定。(4)EGFP基因能表达荧光蛋白，蛋白质含量与荧光强度呈正相关。为比较POL1~POL5、CBF1这6种启动子的作用强度，应分别检测生物学试题第10页（共10页）