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①研究表明，在两种滩涂中随泥层深度的增加底栖动物种类数影响底栖动物在泥层中分布的主要因素是②某同学根据本调查得到“引种互花米草对滩涂表面底栖动物的分布没有影响”的结论，请对这一结论作出评价，并说明理由35.(14分)四尾栅藻是一种淡水藻类，繁殖快、适应性强，可作为制备生物柴油的重要原料之一。为提高四尾栅藻的油脂含量，研究人员将从含油鱼高的紫苏中获得的二酰甘油酰基转移酶基因DGAT1与pBI121质粒构建表达载体，经转化成功获得高产油脂四尾栅藻，主要研究过程如下图，其中DGATI--F(S'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC--3')和DGATI--R(5'一CGGATCCCTACCTFGCACTAGCITITC:一3')是以DGAT1基因为依据设计的一对引物，LacZ基因编码产物在X-gal和PTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。请回答下列问题：茶苏总RNADGATI挠笼资启动子p容其1之是克隆就体③童DGATI载林终子美制原煮4349bp转换(14756tpy雍选大肠杯菌笠制爪点22p③跟翻海峡别序列及领网位点5 GGATCC 3烟宝翻溪蓉化BamH至SaeI5”GAGCT4C3X径是5'TICTAGA 3EcoR I5G量AATTC3(1)过程②应选用的限制酶是和(2)过程③经转化的大肠杆菌通过稀释涂布板法接种到培养基上继续培养。为筛选获得目标菌株，培养基应加入的成分有(3)用两种限制酶切割DGAT1和pBI121,将其连接成重组表达载体，并将其导入四尾栅藻细胞中。与单酶切相比，双切酶的优点是(答出两点即可)。(4)为检测表达载体转化四尾栅藻的情况及确定目的基因是否表达，研究人员进行了如下实验，请完成下表。实验步骤简要操作过程初筛培养经转化后的四尾栅藻接种于含的藻类固体培养基并放宜于人工气候箱培养，一段时间后观察其生长情况在藻类固体培养基上分别挑取数个单藻落接种至藻类液体培养基中光照摇床培养，编号备用PCR验证收集四尾栅藻藻体，提取基因组DNA,以DGAT1一F和DGAT1一R为引物，进行PCR验证，未转化的四尾栅藻作对照油脂含量测定利用抽提法测定的油脂含量结果处理统计并比较PCR验证结果及藻体中油脂的含量第16页共16页