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(2)步骤2和步骤4中所用的质粒与含有目的基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。不同限制酶识别序列及酶切位点见下表。X抗生素抗性基因Bel IBel I启动子,HindⅢ质粒+-Sau3A IBamH I HindⅢSau3 A I HindⅢHindⅢBamH终止子Y抗生素目的基因图1抗性基因图2BamH IBel ISau3A IHindⅢ5'-GGATCC-35'-TGATCA-3'5'-GATC-3'5'-AAGCTT-3'①用Sau3AI对图1中的质粒完全酶切后能获得△种大小不同的DNA片段。②用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时，科研人员将图1所示的质粒用BamHI酶切后，与用Sau3AI酶切获得的目的基因混合，再用DNA连接酶进行连接反应后，导入受体菌，得到以下三种类型的大肠杆菌：a:只含有环状目的基因b:只含有质粒载体c:只含有插入了目的基因的重组质粒如果用含有▲的培养基进行筛选，成活的菌种中b和c是不能区分的，原因是▲。在此基础上，若要筛选出℃的单菌落，还需使用含有▲▲的周体培养基。(3)步骤5中，获得的姜黄素高产工程菌需先进行活化和▲后才能接种到发酵罐中进行大型发酵，以缩短发酵时间。发酵过程需保持▲等条件（答出两点即可），以保证菌体能正常生长。发酵结束后将发酵液进行离心处理，采取适当措施分离纯化姜黄素。理科综合试题A第16页（共16页）