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【智教众创」版权所有，未经许可禁止外传，一经发现追究法律责任】北京智教众创教育咨询有限公司23.(15分，除标注外，每空2分)答案：(1)NdeI、KpnI便于目的基因与质粒的连接，并防止目的基因与质粒的反向连接（至少答出该两点)(3分)(2)吸收周围环境中DNA分子(3)遗传霉素5(4)个体生物学葡聚糖酶和木聚糖酶的活性检测（或使用转化成功的酵母菌酿酒，检测啤酒中葡聚糖和木聚糖的含量)解析：(1)设计葡聚糖酶基因(GluZ)或木聚糖酶基因(XylB)引物时，需要在引物的5’端加上NdeI、KpnI的酶切位点，因为在质粒的启动子和终止子之间具有三个酶切位点，分别是NdeI、KpnI和NotI,而NotI会把质粒切坏，故只能选择NdeI、KpnI。在引物的5’端加上NdeI、KpnI酶切位点的目的是便于目的基因与质粒的连接，并防止目的基因与质粒的反向连接。(2)用特定溶液处理酵母菌细胞，使之处于吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后将重组质粒G和重组质粒X共同转入该状态的酵母菌。(3)为检测上述转化是否成功，可在培养基中加入遗传霉素进行初步检测，然后选取培养基中单一且菌落较大的6个菌落分别接种于酵母菌液体培养液中，30℃条件下振荡培养48小时，吸取适量菌液离心，弃上清液，用1l无菌水稀释均匀，吸取500μl置于刚果红琼脂板的6个圆孔中，分别予以标记，如果酵母菌中同时含有质粒G和质粒X,具有降解葡聚糖和木聚糖的能力，则在两个刚果红板上都会在产生透明圈，观察结果可知，只有菌落是5同时含有质粒G和质粒X。(4)除了进行上述检测，还需要进行个体生物学水的鉴定，如葡聚糖酶和木聚糖酶的活性检测（或使用转化成功的酵母菌酿酒，检测啤酒中葡聚糖和木聚糖的含量)。生物答案第5页（共5页）